c18液相色譜柱柱效測試

C18 液相色譜柱柱效測試是評估色譜柱分離性能的重要實驗。下面是 C18 液相色譜柱柱效測試的基本步驟:

1. 選擇適當的流動相:通常使用反相色譜法,選擇水和有機溶劑(如甲醇、乙腈等)的混合物作為流動相,根據待測樣品的性質和分離要求,調整流動相的比例和 pH 值。

2. 制備樣品:將待測樣品溶解在流動相中,使用微量進樣器將樣品注入色譜柱。

3. 設置色譜條件:設置適當的色譜條件,如流速、柱溫、檢測波長等。通常采用等度洗脫或梯度洗脫的方式,根據樣品的復雜程度和分離要求選擇合適的洗脫方式。

4. 記錄色譜圖:啟動液相色譜系統,記錄樣品的色譜圖。根據色譜圖中的峰形、峰高、峰面積等參數,評估色譜柱的分離效率和柱效。

5. 計算柱效:根據色譜圖中的峰寬和保留時間等參數,可以計算出色譜柱的理論塔板數(N)和理論塔板高度(H),從而評估色譜柱的柱效。通常要求色譜柱的理論塔板數至少達到 3000 以上,理論塔板高度在 1-3 毫米之間。

需要注意的是,C18 液相色譜柱柱效測試需要在一定的實驗條件下進行,包括流動相的選擇、樣品的制備、色譜條件的設置等。同時,測試結果也受到儀器的穩定性、數據處理方法等因素的影響。因此,在進行 C18 液相色譜柱柱效測試時,需要嚴格控制實驗條件,并采用合適的數據處理方法,以獲得準確的測試結果。

 


發布于: 2023-08-28
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